豆芽中有機(jī)磷類農(nóng)藥殘留的氣相色譜質(zhì)譜法測(cè)定

        近年來，蔬菜中農(nóng)藥殘留檢測(cè)技術(shù)不斷發(fā)展，運(yùn)用氣相色譜、氣相色譜一質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)檢測(cè)有機(jī)磷類農(nóng)藥殘留的方法十分成熟。前處理也出現(xiàn)了QuEChERS等新技術(shù)，但目前在國內(nèi)實(shí)際應(yīng)用較少。本試驗(yàn)結(jié)合實(shí)驗(yàn)室條件，采用固相萃取技術(shù)，建立了豆芽中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的氣相色譜一質(zhì)譜檢測(cè)法，為進(jìn)一步規(guī)范市場(chǎng)提供。

1  材料與方法

1.1儀器與試劑

日本島津GC2010氣相色譜質(zhì)譜儀，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器，固相萃取裝置，氮吹儀，離心機(jī)；

C18柱：2 000 mg（Varian）；  

PSA柱：500 mg（Varian）；

正己烷（色譜級(jí)），丙酮（色譜級(jí)）。

1.2溶液配制及貯存

取農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品甲拌磷、甲基對(duì)硫磷、甲基嘧啶磷、馬拉硫磷、毒死蜱、喹硫磷、殺撲磷、殺蟲畏、丙溴磷、乙硫磷（國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究中心提供，標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)濃度均為100ug／ml）各l ml，用正己烷定容至10 ml，得到濃度為10 ug/ml的標(biāo)準(zhǔn)溶液，4℃冷藏保存，作為標(biāo)準(zhǔn)貯備液。分別用正己烷稀釋（濃縮）為1、2、3、4、5 ug/ml，作為標(biāo)準(zhǔn)工作液。    洗脫液配制：丙酮：正己烷=2：8

1.3樣品制備

1.3.1樣品前處理稱取樣品10 9，攪碎，加入20 ml乙腈，超聲波提取15 min，加入氯化鈉2.5 g，4 000 r/rain離心5 min。上清液待用。

1.3.2凈化濃縮  C18柱凈化：預(yù)先用乙腈（5 ml x2）和純水（5ml x2）平衡C18柱，將上清液移人C18柱，12 ml乙腈+水（3+1）淋洗柱子，真空抽干。用洗脫液定容至lml。

PSA柱凈化：PSA柱預(yù)先用洗脫液（5 ml x2）平衡，將上述1 ml樣液過柱，3ml洗脫液洗脫5次，40℃水浴蒸發(fā)，氮吹定容至lml，待用。

1.4色譜質(zhì)譜條件

色譜柱：毛細(xì)管柱Rtx -5，30 mx0.25 mmx0. 25 um。

氣相色譜條件：柱溫（程序升溫）：60℃保持3 rain．以20C/min升至200℃，以2℃/min升至220℃，再以20℃/min升至280C，保持9 min；進(jìn)樣口溫度：260C；載氣：氦氣≥99.995%，1 ml/min；進(jìn)樣量：2ul。

質(zhì)譜測(cè)定條件：GC - MS接口溫度：280℃；離子源溫度：200℃；質(zhì)譜檢測(cè)方式：SIM方式（選擇離子檢測(cè)）。

定性確認(rèn)：在保留時(shí)間窗口內(nèi)出現(xiàn)與對(duì)應(yīng)目標(biāo)化合物監(jiān)測(cè)離子相一致的峰，且與目標(biāo)監(jiān)測(cè)離子比例一致，視為疑似檢出。必要時(shí)，需要SCAN方式進(jìn)一步確認(rèn)。

1.5定性分析標(biāo)準(zhǔn)和方法

色譜峰采用全掃描譜庫檢索與提取相應(yīng)保留時(shí)間質(zhì)量色譜圖進(jìn)行特征離子定性相結(jié)合的方法定性。定性標(biāo)準(zhǔn)：確定每種標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中的2個(gè)特征離子，1個(gè)定量離子（見表1）；在相應(yīng)保留時(shí)間下，所選離子均應(yīng)出現(xiàn)，且所選擇的離子豐度比與標(biāo)準(zhǔn)樣品的離子豐度比相一致（允許有±20%的偏差）。

1.6定量分析方法

采用外標(biāo)法單離子定量測(cè)定，即以各自基峰離子作為定量離子，扣除空白后，峰面積與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較定量。計(jì)算公式如下。為減少基質(zhì)的影響，定量用標(biāo)準(zhǔn)溶液用空白溶液配制，且標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度與待測(cè)化合物的濃度接近。

X=Ai'C'V/As- in

式中：X-試樣中目標(biāo)化合物含量，mg/kg；Ai-樣液中目標(biāo)化合物峰面積；As-標(biāo)準(zhǔn)溶液中目標(biāo)化合物峰面積；C一標(biāo)準(zhǔn)工作液中目標(biāo)化合物的濃度，ug/ml；v--zui終樣液體積，ml;m-zui終樣液所代表的試樣量，g。

2結(jié)果與分析

2.1特征離子的選擇

本試驗(yàn)采用選擇離子檢測(cè)模式（ SIM），選擇特征離子進(jìn)行檢測(cè)能有效地降低背景干擾，提高測(cè)定靈敏度。根據(jù)農(nóng)藥出峰順序采用分時(shí)間段檢測(cè)模式，在某一時(shí)間段檢測(cè)一個(gè)或幾個(gè)待測(cè)物質(zhì)，使得特征離子在單位時(shí)間內(nèi)被掃描的次數(shù)增多，降低背景干擾，提高信噪比，檢測(cè)的組分分段完成。    特征離子的選擇遵循以下原則：（1）專屬性：表征某一特定組分的特征離子質(zhì)量數(shù)盡量不與表征其它組分的特征離子質(zhì)量數(shù)相同。（2）靈敏度：碎片離子豐度應(yīng)盡量大。（2）重現(xiàn)性：選擇質(zhì)量數(shù)大、對(duì)稱性高、重現(xiàn)性好的離子。根據(jù)此原則，選擇的特征離子見表1。

2.2標(biāo)準(zhǔn)曲線制作

取配制好的標(biāo)準(zhǔn)溶液，進(jìn)樣，定性確定有機(jī)磷農(nóng)藥品種及保留時(shí)間，而后SIM方式下進(jìn)樣，獲得標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)圖譜（圖1）。測(cè)得不同濃度標(biāo)準(zhǔn)定量離子的峰面積，繪制成標(biāo)準(zhǔn)曲線（表2）。

10種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)在0. 9901  -0.9988之間；方法定量檢出下限（S/N=10，n=3）在2.6-3.8 ug/kg之間；測(cè)定結(jié)果的誤差小于算術(shù)平均值的5.2% -13.5%。2.3  市場(chǎng)抽樣檢測(cè)結(jié)果

為了解市場(chǎng)上豆芽產(chǎn)品的農(nóng)藥殘留情況，我們從泰安市場(chǎng)上隨機(jī)抽取13個(gè)農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)銷售的豆芽樣品26份，對(duì)上述10種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留進(jìn)行檢測(cè)，所得譜圖如圖2，回收率60%一85%。

檢測(cè)結(jié)果（表3）表明，所檢豆芽樣品均未檢出上述10種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留，單項(xiàng)合格率100%。雖本試驗(yàn)檢測(cè)的10項(xiàng)指標(biāo)全部合格，但仍不排除使用其它藥劑的可能性。

3結(jié)論

本試驗(yàn)建立了豆芽中10種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留

的氣相色譜一質(zhì)譜分析方法。該方法前處理簡(jiǎn)單，樣品雜質(zhì)較少，分離較好，無明顯雜峰，10種農(nóng)殘標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)在0.9901 -0.9988之間；方法定量檢出下限（S/N=10，n=3）在2.6 -3.8 ug,/kg之間；測(cè)定結(jié)果的誤差小于算術(shù)平均值的5.2% -13.5%，回收率60%~80%。對(duì)泰安13個(gè)農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)26個(gè)批次豆芽產(chǎn)品進(jìn)行檢測(cè)，10種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留均為未檢出，單項(xiàng)合格率100%。