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液相色譜流動相脫氣的主要方法

 更新時(shí)間:2023-12-19 點(diǎn)擊量:874
HPLC系統(tǒng)一般由輸液泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測器、數(shù)據(jù)記錄及處理裝置等組成。其中輸液泵、色譜柱、檢測器是關(guān)鍵部件。此外,還可根據(jù)需要配置梯度洗脫裝置、在線脫氣機(jī)、自動進(jìn)樣器、預(yù)柱或保護(hù)柱、柱溫控制器等,現(xiàn)代HPLC儀還有微機(jī)控制系統(tǒng),進(jìn)行自動化儀器控制和數(shù)據(jù)處理。制備型HPLC儀還備有自動餾分收集裝置。
HPLC的工作過程:輸液泵將流動相以穩(wěn)定的流速(或壓力)輸送至分析體系,在色譜柱之前通過進(jìn)樣器將樣品導(dǎo)入,流動相將樣品帶入色譜柱,在色譜柱中各組分因在固定相中的分配系數(shù)或吸附力大小的不同而被分離,并依次隨流動相流至檢測器,檢測到的信號送至數(shù)據(jù)系統(tǒng)記錄、處理以及保存。
液相色譜流動相脫氣使用較多的是離線超聲波振蕩脫氣、在線惰性氣體鼓泡吹掃脫氣和在線真空脫氣。
超聲波振蕩脫氣:將配制好的流動相連容器放入超聲水槽中脫氣10-20min。這種方法比較簡便,又基本上能滿足日常分析操作的要求,所以,目前仍廣泛采用。
惰性氣體鼓泡吹掃脫氣:將氣源(鋼瓶)中的氣體(氦氣)緩慢而均勻地通入儲液罐中的流動相中,氦氣分子將其它氣體分子置換和頂替出去,而它本身在溶劑中的溶解度又很小,微量氦氣所形成的小氣泡對檢測無影響。
真空脫氣裝置:將流動相通過一段由多孔性合成樹脂膜制造的輸液管,該輸液管外有真空容器,真空泵工作時(shí),膜外側(cè)被減壓,分子量小的氧氣、氮?dú)狻⒍趸季蜁哪?nèi)進(jìn)入膜外而被脫除。