1. 色譜柱的安裝
當(dāng)把毛細(xì)管柱安裝在色譜儀上時(shí),需要將其兩端分別與進(jìn)樣口和檢測器相連接。不同廠家的儀器所用的接頭有兩種,一是內(nèi)螺紋接頭,二是外螺紋接頭。原理都是用一個(gè)石墨密封墊。通過接頭壓緊而達(dá)到固定和密封的目的。安裝毛細(xì)柱時(shí)應(yīng)注意三個(gè)問題:
*,先將密封墊套在柱頭,此時(shí)應(yīng)將柱頭向下,避免密封墊碎硝進(jìn)入柱管而造成堵塞。將石墨墊套在柱頭后,應(yīng)將柱頭截去1~2cm。可用專門的柱切割器,也可用一個(gè)開安倍瓶的磁片,在柱頭上輕輕地劃一下,然后用手別斷。這樣做可以保證柱端是整潔的,又避免了柱頭污染物對分析的干擾,因?yàn)榻厝チ舜┻^密封墊時(shí)可能進(jìn)入柱頭的污染物,或者運(yùn)輸過程中可能損壞的柱端。
第二,柱端伸出密封墊的長度,不同的儀器有不同的規(guī)定,應(yīng)嚴(yán)格按儀器說明確定。比如,HP儀器要求進(jìn)樣口一端伸出5mm左右,檢測器一端則依據(jù)檢測器的不同而不同??偟脑瓌t是進(jìn)樣口一端先安裝好后,柱端要處于分流點(diǎn)以上,并位于襯管中央,檢測器一端則是柱出口盡量接近檢測點(diǎn)(如FID的火焰),以避免死體積造成的柱外效應(yīng)。為保證柱端伸出的長度準(zhǔn)確,可在截去柱端后,先量好柱頭伸出長度,然后用記號筆或改字液在接頭下方的色譜柱上做記號,擰緊接頭以后保證該記號正好位于柱頭端面。這樣就避免了擰緊過程中柱管移動(dòng)可能造成的伸出長度不準(zhǔn)確。
第三,,接頭不要擰的太緊,以避免將色譜柱壓裂或壓碎。一般新的石墨墊用手?jǐn)Q緊后在用扳手?jǐn)Q1/4圈即可。如果是重復(fù)使用的石墨墊,則要多擰緊一點(diǎn),直到用手輕輕拉柱管拉不動(dòng)為止。原則上每次安裝色譜柱都要用新的石墨墊,不過同一色譜柱拆下在安裝時(shí)可重復(fù)使用石墨墊,但重復(fù)使用的次數(shù)不要超過3次,否則會失去密封性。
2. 色譜柱的維護(hù)
每次新安裝了色譜柱后,都要在進(jìn)樣前進(jìn)行老化。具體的方法是,先接通載氣,然后將柱溫從60℃左右以5~10℃/min的速率程序升溫到色譜柱的zui高使用溫度以下30℃(如HP-5柱可到280℃)或者實(shí)際分析操作溫度以上30℃(如分析時(shí)使用240℃,老化溫度應(yīng)為270℃),并在高溫時(shí)恒溫30到120min,直到記錄的基線穩(wěn)定為止。如果基線難以穩(wěn)定,可重復(fù)進(jìn)行幾次程序升溫老化,也可在高溫下恒定更長時(shí)間。注意,一定要等到基線穩(wěn)定后,才可做空白運(yùn)行或進(jìn)樣分析。色譜柱使用一段時(shí)間后,柱內(nèi)滯留一些高沸點(diǎn)組分,這時(shí)基線可能出現(xiàn)波動(dòng)或出現(xiàn)鬼峰。解決此問題的方法也是老化。
暫時(shí)不用的色譜柱從儀器上卸下后,柱兩端應(yīng)當(dāng)用一塊硅橡膠(可利用廢進(jìn)樣隔墊)堵上,并放在相應(yīng)的包裝盒中,以免柱頭被污染。
每次關(guān)機(jī)都應(yīng)將柱箱溫度降到50℃以下,然后再關(guān)電源和載氣。溫度高時(shí)切斷載氣,可能會因?yàn)榭諝猓ㄑ鯕猓U(kuò)散進(jìn)入柱管而造成固定液的氧化降解。
儀器有過溫保護(hù)功能時(shí),每次新安裝了色譜柱都要重新設(shè)定保護(hù)溫度,(超過此溫度值時(shí),儀器會自動(dòng)停止加熱),以確保柱箱溫度不超過色譜柱的zui高使用溫度。
3. 色譜柱的修理
色譜柱都有一定的壽命,它與所分析的樣品狀況和維護(hù)情況有直接的關(guān)系。柱壽命完結(jié)的主要標(biāo)志是固定液流失太多而失去了分離能力,柱管堵塞和斷裂也是導(dǎo)致柱失效的原因。有是只是因?yàn)橐恍└叻悬c(diǎn)的極性化合物的吸附而使色譜柱喪失分離能力,這時(shí)可對其進(jìn)行清洗和修理。具體辦法是先在高溫下老化柱子,用載氣將污染物沖洗出來,若柱子仍不能恢復(fù),就從儀器上卸下柱子,將柱頭截去10cm或更長(柱頭是zui容易被污染的),再安裝上測試。這是常用的柱性能恢復(fù)措施。如果還不起作用,可再反復(fù)注射溶劑進(jìn)行清洗,常用的溶劑依次為丙酮、甲苯、乙醇、氯仿和二氯甲苯。每次可進(jìn)樣5~10ul。這一辦法常常奏效。如果色譜柱性能還不好,就只有卸下柱子,用二氯甲烷或氯仿沖洗??捎贸檎婵盏姆椒▽⑷軇牧硪欢宋?,也可用對溶劑瓶加壓的方法將溶劑壓入。溶劑的用量依柱子的污染程度而定,一般20ml左右。如果這一方法仍不起作用,說明色譜柱應(yīng)該報(bào)廢了。需要說明。只有固定液交聯(lián)的柱子才可以用此法清洗,否則會將固定液全部洗掉。
我們zui不愿意看到的事故是由于意外原因?qū)⑿阅芎芎玫纳V柱折斷了。這時(shí)斷裂的色譜柱固然可以作為短色譜柱使用,但若能“斷指再接”不就可以減少損失了嗎?市場上有商品柱連接器出售,到價(jià)格稍高,其實(shí)我們也可以用一截玻璃管連接斷柱。既用干凈的玻璃管在煤氣燈上拉出一段細(xì)管子,管子中間的內(nèi)徑接近于柱外徑,管子兩端的內(nèi)徑大于柱外徑。這樣將折斷的柱子從玻璃管兩端插入,直到兩端對接,再在玻璃管與色譜柱的空隙中填上聚酰亞胺黏合劑,固化后柱子就連接好了。這樣連接后柱性能會有一定的下降,但仍能使用。連接好壞的關(guān)鍵是玻璃管中間一段的內(nèi)徑要接近或等于色譜柱的外徑。還有斷柱的端面要切割整齊,盡可能使兩個(gè)端面對接在一起。